Tras pasar por la Academia de Arte Dramático y por algunos espectáculos teatrales, Margherita Buy debuta en el cine en 1986 con "La Seconda Notte" ("La Segunda Noche"), de Nino Bizarri. Cinco años después gana el Nastro D´Argento (Lazo de Plata) como Mejor Actriz protagonista, y el David de Donatello con "La Stazione" ("La estación"), de Sergio Rubini. Trabaja con muchos de los más importantes directores italianos, desde Daniele Luchetti a Carlo Verdone, de Mario Monicelli a Cristina Comencini y Paolo Virzì. En 1999 obtiene un segundo David de Donatello con "Fuori dal Mondo" ("Fuera del Mundo"), de Giuseppe Piccioni. Otro Nastro d´Argento (Cinta de Plata) le llega gracias a su papel de coprotagonista en "El Hada Ignorante", de Ferzan Ozpetek.

El constante éxito de Margherita Buy se confirma en 2005 con "Manuale d´amore", de Giovanni Veronesi, y "I Giorni dell´abbandono" ("Los Días del Abatimiento"), de Roberto Faenza. Con soltura, a sus anchas, ya sea en la comedia como en los papeles dramáticos, la actriz interpreta en 2006 "El Caimán" ("Il Caimano"), de Nanni Moretti; "La Sconosciuta", ("La desconocida") de Giuseppe Tornatore, y "Commediasexi", de Alessandro D´Alatri. Magnífica también en sus apariciones televisivas, destacan entre otros títulos, "Incompreso" ("Incomprendido"), dirigida por Enrico Oldoini, y "Il Commissario Maigret", de Renato De Maria. En 2006 regresa al teatro, llevando a los escenarios "Due Partite" ("Dos partidas") de Cristina Comencini.

Teatro
“La stazione” 1986 dirigido por Ennio Coltorti; “Italia-Germania quattro a tre” 1987 dirigido por Sergio Rubini; “Ce n’est qu’un debut” 1991 dirigido por Massimo Navone; “Separazione” 1997 dirigido por Patrick Rossi Gastaldi; “La tempesta” 1999 dirigido por G. Barberio Corsetti.

Televisión
“La vita che verrà” 1998 de Pasquale Pozzessere; “Incompreso” 2002 de Enrico Oldoini

Cine
“Domani accadrà” 1988, “La settimana della sfinge” 1990, “Arriva la bufera” 1992 de Daniele Luchetti; “La stazione” 1990, “Prestazione straordinaria” 1994 y "Con tutto l’amore” 1999 de Sergio Rubini; “Chiedi la luna” 1990, “Ultimo desiderio di un condannato a nozze” 1992, “Il cielo è sempre più blu” 1995, “Cuori al verde” 1996, “Fuori dal mondo” 1998 de Giuseppe Piccioni; “Maledetto il giorno che ti ho incontrato” 1990 y “Ma che colpa abbiamo noi” 2003 de Carlo Verdone; “Cominciò tutto per caso” 1992 de Umberto Marino; “Raphael” 1993 de Nicole Garcia; “Va dove ti porta il cuore” 1995 y “Il più bel giorno della mia vita” 2001 de Cristina Comencini; “Facciamo Paradiso” 1995 de Mario Monicelli; “Testimone a rischio” 1996 de Pasquale Pozzessere; “Dolce far niente” 1997 de Nae Caranfil; “L’ombra del gigante” 1999 de Roberto Petrocchi; “Controvento” 1999 de Peter Del Monte; “Le fate ignoranti” 2000 de Ferzan Ozpetek.