Michael Gambon comenzó su carrera con el Edwards/ Macliammoir Gate Theatre de Dublín. Se unió al National Theatre para su temporada inaugural bajo la dirección de Laurence Olivier en el Old Vic en 1963 y allí apareció en "Hamlet", "Saint Joan", "The Recruiting Officer", "Andorra", "Philoctetes", "Othello", "The Royal Hunt of the Sun", "Las brujas de Salem" (The Crucible), "Madre coraje" (Mother Courage), "Love for Love", "Juno and the Paycock" y "The Storm".

Dentro de repertorio, principalmente en el Birmingham Rep, Gambon interpretó los papeles protagonistas de "Othello", "Macbeth" y "Coriolanus".

En el West End, ha trabajado en "Otherwise Engaged" de Simon Gray; "The Norman Conquest" de Alan Ayckbourn; "Just Between Ourselves"; "Alice’s Boys", con Ralph Richardson; "Old Times" de Harold Pinter; en el papel del título de "Tío Vania"; "Tom and Clem"; y "No Man’s Land."

Con la Royal Shakespeare Company, pasó una temporada en el Aldwych y más tarde interpretó al rey de "Rey Lear" y a Antonio en "Antonio y Cleopatra" junto a Helen Mirren, en el Stratford y el Barbican.

Para el National Theatre, Gambon ha aparecido en los estrenos de "Betrayal" de Harold Pinter; "Close of Play" de Simon Gray; "Tales From Hollywood" de Christopher Hampton; "Sisterly Feelings" de Alan Ayckbourn; "A Chorus of Disapproval", por la que ganó el premio Olivier; así como "A Small Family Business"; "Ricardo III"; "Othello"; "Tons of Money"; en el papel del título de "The Life of Galileo"; "Volpone"; y "Skylight". Recreó el papel de la última en Broadway en 1996 por el que fue nominado al premio Tony. También para el National Theatre, Gambon interpretó a Eddie Carbone en la obra de Arthur Miller, "A View From the Bridge" que luego se trasladó al Aldwych Theatre y por la que ganó el premio a mejor drama de 1987.

También formó parte de "Mountain Language" de Harold Pinter, "Cressida" en el Almeida, y también de Pinter, "The Caretaker" por la que fue nominado al premio Olivier. Gambon también dirigió la puesta de Richard Harris en el Platford de "Visiting Hour".

Sus apariciones en televisión incluyen la primera serie en color de la cadena BBC, The Borderers; Eyeless in Gaza; The Other One con Richard Briers; La gaviota (The Seagull); The Holy Experiment; Oscar; Ghosts y la serie de Dennis Potter, El detective cantante (The Singing Detective), por la que ganó el premio BAFTA, el premio del Gremio de la Prensa y el Royal Television Society. También protagonizó The Heat of the Day, con guión de Harold Pinter sobre una novela de Elizabeth Bowen, y fue Archie Rice en El animador (The Entertainer) de John Osborne. Más recientemente interpretó a Lyndon Johnson en el filme de la HBO, Camino a la guerra (Path to War) y también protagonizó la serie de HBO, Angels in America, dirigida por Mike Nichols.

Entre los trabajos para el cine de Gambon se pueden reseñar Turtle Diary; Una llamada a media noche (Paris By Night) de David Hare; Una árida estación blanca (A Dry White Season), con Marlon Brando; Seducir a Raquel (The Rachel Papers); El cocinero, el ladrón, su mujer y su amante (The Cook, The Thief, His Wife and Her Lover ) de Peter Greenaway; El jugador (The Gambler); El imperio del mal (Mobsters); Borrón y cuenta nueva (Clean Slate); Toys (Fabricando ilusiones) (Toys); Indian Warrior; Las alas de la paloma (Wings of the Dove); El sueño inocente (The Innocent Sleep); El baile de agosto (Dancing at Lughnasa); Sleepy Hollow; El dilema (The Insider); Gosford Park; Open Range y cuatro de las películas de Harry Potter: Harry Potter y el prisionero de Azkaban (Harry Potter and the Prisoner of Azkaban), Harry Potter y el cáliz de fuego (Harry Potter and the Goblet of Fire), Harry Potter y la orden del Fénix (Harry Potter and the Order of the Phoenix) y Harry Potter y el misterio del príncipe (Harry Potter and the Half-Blood Prince).

En 1998, Gambon fue reconocido con un KBE en la Lista de Honor de la Reina.